RESUMO
CONTEXT: Gastric cancer is one of the top list of cancer types that most leads to death in Brazil and worldwide. Helicobacter pylori(H. pylori) is a class I carcinogen and infect almost 90% of chronic gastritis patients. Some genotypes confer different virulent potential to H. pylori and can increase the risk of gastritis development. Methylation of CpG islands can inactivate tumor suppressor genes and therefore, it can be involved in the tumorigenic process. CDH1 is a tumor suppressor gene that encodes the E-cadherin protein, which is important in maintaining cell-cell contacts. The inactivation of this gene can increase the chance of metastasis. Promoter methylation of CDH1 at early steps of gastric carcinogenesis is not yet completely understood. OBJECTIVE: In this study, we investigated the methylation status of CDH1 in chronic gastritis samples and correlated it with the presence of H. pylori. METHODS: Sixty gastric mucosal biopsies were used in this study. The detection of H. pylori was performed with the PCR primers specific to urease C gene. H. pylori genotyping was performed by PCR to cagA and vacA (s and m region). The methylation status of these gene CDH1 was analyzed using methylation-specific polymerase chain reaction and direct sequencing of the PCR products was performed using primers methylated and unmethylated in both forward and reverse directions. RESULTS: H. pylori was detected in 90% of chronic gastritis samples; among these 33% were cagA positive and 100% vacA s1. The genotype vacA s2/m1 was not detected in any sample analyzed. Methylation of CDH1 was detected in 63.3% of chronic gastritis samples and 95% of them were also H. pylori-positive. CONCLUSION: This work suggests that CDH1 gene methylation and H. pylori infection are frequent events in samples from Brazilian patients with chronic gastritis and reinforces the correlation between H. pylori infection and CDH1 inactivation in early steps of gastric tumorigenesis.
Assuntos
Caderinas/genética , Mucosa Gástrica/microbiologia , Gastrite/microbiologia , Infecções por Helicobacter/microbiologia , Helicobacter pylori/genética , Antígenos de Bactérias/genética , Antígenos CD , Proteínas de Bactérias/genética , Estudos de Casos e Controles , Doença Crônica , Metilação de DNA , Genótipo , Infecções por Helicobacter/patologia , Helicobacter pylori/patogenicidade , Humanos , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
CONTEXT: Gastric cancer is one of the top list of cancer types that most leads to death in Brazil and worldwide. Helicobacter pylori(H. pylori) is a class I carcinogen and infect almost 90 percent of chronic gastritis patients. Some genotypes confer different virulent potential to H. pylori and can increase the risk of gastritis development. Methylation of CpG islands can inactivate tumor suppressor genes and therefore, it can be involved in the tumorigenic process. CDH1 is a tumor suppressor gene that encodes the E-cadherin protein, which is important in maintaining cell-cell contacts. The inactivation of this gene can increase the chance of metastasis. Promoter methylation of CDH1 at early steps of gastric carcinogenesis is not yet completely understood. OBJECTIVE: In this study, we investigated the methylation status of CDH1 in chronic gastritis samples and correlated it with the presence of H. pylori. METHODS: Sixty gastric mucosal biopsies were used in this study. The detection of H. pylori was performed with the PCR primers specific to urease C gene. H. pylori genotyping was performed by PCR to cagA and vacA (s and m region). The methylation status of these gene CDH1 was analyzed using methylation-specific polymerase chain reaction and direct sequencing of the PCR products was performed using primers methylated and unmethylated in both forward and reverse directions. RESULTS: H. pylori was detected in 90 percent of chronic gastritis samples; among these 33 percent were cagA positive and 100 percent vacA s1. The genotype vacA s2/m1 was not detected in any sample analyzed. Methylation of CDH1 was detected in 63.3 percent of chronic gastritis samples and 95 percent of them were also H. pylori-positive. CONCLUSION: This work suggests that CDH1 gene methylation and H. pylori infection are frequent events in samples from Brazilian patients with chronic gastritis and reinforces the correlation between H. pylori infection and CDH1 inactivation ...
CONTEXTO:O câncer gástrico é uma das principais neoplasias que causam o óbito no Brasil e no mundo. Helicobacter pylori é um carcinógeno do tipo I relacionado à gastrite crônica. Diferenças no grau de virulência de suas cepas levam a maior risco de desenvolvimento de doenças gástricas. A metilação de ilhas CpGs está envolvida com o processo de tumorigênese em diferentes tipos de câncer. CDH1 é um gene supressor tumoral que, quando inativado, pode aumentar as chances de metástase. A metilação deste gene em estágios precoces da carcinogênese gástrica ainda não é totalmente compreendida. OBJETIVO: Investigar o padrão de metilação do gene CDH1 em amostras de gastrites crônicas e correlacionar com a presença do H. pylori. MÉTODOS: Foram usadas 60 biopsias de mucosas gástricas. A detecção de H. pylori foi realizada por PCR para o gene da urease C e a genotipagem com PCR para os genes cagA e vacA (região s e m). O padrão de metilação do gene CDH1 foi analisado usando a técnica de PCR e específica para a metilação e sequenciamento direto dos produtos de PCR. RESULTADOS: A bactéria H. pylori foi detectada em 90 por cento das amostras de gastrites crônicas; destas, 33 por cento portavam o gene cagA e 100 por cento vacA s1. O genótipo vacA s2/m1 não foi detectado nas amostras analisadas. Metilação de CDH1 foi detectada em 63,3 por cento das amostras de gastrites e 95 por cento delas eram portadoras de H. pylori. CONCLUSÃO: Os resultados deste estudo sugerem que a metilação em CDH1 e a infecção pelo H. pylori são eventos frequentes em amostras de pacientes brasileiros com gastrite crônica e reforça a correlação entre infecção por H. pylori e inativação do gene CDH1 em estágios precoces da tumorigênese gástrica.
Assuntos
Humanos , Caderinas/genética , Mucosa Gástrica/microbiologia , Gastrite/microbiologia , Infecções por Helicobacter/microbiologia , Helicobacter pylori/genética , Antígenos de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/genética , Estudos de Casos e Controles , Doença Crônica , Metilação de DNA , Genótipo , Infecções por Helicobacter/patologia , Helicobacter pylori/patogenicidade , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
AIM: To verify the methylation status of CDH1, DAPK, COX2, hMLH1 and CDKN2A genes and to evaluate their association with Helicobacter pylori (H. pylori)-cagA(+) and Epstein Barr virus (EBV) infections in gastric adenocarcinomas. METHODS: Methylation-specific PCR (MSP) assay was performed in 89 primary gastric carcinomas (intestinal and diffuse types). Microsatellite instability (MSI) analysis was performed using the BAT26 primer set and PCR products were analyzed with the ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer using Genescan 3.7 software (Applied Biosystems). Detection of H. pylori and genotyping were performed by PCR, using specific primers for ureaseC and cagA genes. The presence of EBV was assessed by in situ hybridization. Statistical analyses were performed using the chi(2) or Fisher's exact test. RESULTS: The most frequent hypermethylated gene was COX-2 (63.5%) followed by DAPK (55.7%), CDH1 (51%), CDKN2A (36%) and hMLH1 (30.3%). Intestinal and diffuse adenocarcinomas showed different methylation profiles and there was an association between methylation of E-CDH1 and H. pylori-cagA(+) in the intestinal adenocarcinoma type. MSI was correlated with hMLH1 methylation. There was an inverse correlation between DAPK hypermethylation and MSI. CONCLUSION: We found a strong association between CDH1 methylation and H. pylori-cagA(+) in intestinal-type gastric cancer, association of MSI and better prognosis and an heterogeneous COX-2 overexpression.
Assuntos
Adenocarcinoma/genética , Metilação de DNA , DNA de Neoplasias/metabolismo , Helicobacter pylori/isolamento & purificação , Herpesvirus Humano 4/isolamento & purificação , Instabilidade de Microssatélites , Neoplasias Gástricas/genética , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/genética , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/metabolismo , Adenocarcinoma/microbiologia , Adenocarcinoma/virologia , Antígenos CD , Proteínas Reguladoras de Apoptose/genética , Proteínas Reguladoras de Apoptose/metabolismo , Caderinas/genética , Caderinas/metabolismo , Proteínas Quinases Dependentes de Cálcio-Calmodulina/genética , Proteínas Quinases Dependentes de Cálcio-Calmodulina/metabolismo , Inibidor p16 de Quinase Dependente de Ciclina/genética , Inibidor p16 de Quinase Dependente de Ciclina/metabolismo , Ciclo-Oxigenase 2/genética , Ciclo-Oxigenase 2/metabolismo , Proteínas Quinases Associadas com Morte Celular , Infecções por Vírus Epstein-Barr/complicações , Feminino , Infecções por Helicobacter/complicações , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Proteína 1 Homóloga a MutL , Proteínas Nucleares/genética , Proteínas Nucleares/metabolismo , Estudos Retrospectivos , Neoplasias Gástricas/microbiologia , Neoplasias Gástricas/virologiaRESUMO
INTRODUÇAO: Apesar da alta freqüência de infecção por Helicobacter pylori na população, somente uma minoria de indivíduos desenvolve câncer gástrico. É provável que a colonização da mucosa por cepas patogênicas, levando a maior agressão e inflamação da mucosa seja um dos elos da cadeia de eventos da oncogênese gástrica. OBJETIVOS: Investigar a freqüência de cepas patogênicas cagA e vacA do H. pylori em pacientes com câncer gástrico. MATERIAL E MÉTODOS: Foram estudados retrospectivamente 42 pacientes com câncer gástrico. A infecção por H. pylori foi avaliada por exame histológico e pelo PCR para identificação dos genótipos cagA e vacA em amostras de material fixado em formalina e incluído em parafina. RESULTADOS: A análise histológica permitiu a visualização direta do H. pylori em 85,7 por cento dos casos, e o método de PCR para o gene urease C demonstrou a presença de DNA da bactéria em 95 por cento dos casos. O gene cagA foi detectado em amostras de 23 pacientes (54,7 por cento) com câncer gástrico. O alelo s1 do gene vacA foi identificado em amostras de 24 pacientes (57,1 por cento) e o alelo m1, em amostras de 26 pacientes (61,9 por cento). Os alelos s1 e m1 foram identificados simultaneamente em 24 pacientes (57,1 por cento). O alelo s2 foi identificado em amostras de quatro pacientes (9,5 por cento), e o alelo m2, em amostras de três pacientes (7,1 por cento). A freqüência de infecção pelo Helicobacter pylori foi similar em ambos os tipos histológicos de câncer gástrico (intestinal e difuso). CONCLUSÕES: Os resultados confirmam a relevância dos genótipos patogênicos cagA e vacA do H. pylori para lesões orgânicas significativas tais como o câncer gástrico, sugerindo a participação dessa bactéria na cadeia de eventos da oncogênese gástrica.
Assuntos
Humanos , Antígenos de Bactérias/genética , Brasil , Helicobacter pylori/genética , Helicobacter pylori/patogenicidade , Infecções por Helicobacter/microbiologia , Mucosa Gástrica/metabolismo , Neoplasias Gástricas/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Proteínas de Bactérias/genéticaRESUMO
Squamous cell carcinoma of the upper aerodigestive tract (UADT) is associated with environmental factors, especially tobacco and alcohol consumption. Genetic factors, including cyclin D1 (CCND1) polymorphism have been suggested to play an important role in tumorigenesis and progression of UADT cancer. To investigate the relationship between CCND1 polymorphism on susceptibility for UADT cancers, 147 cancer and 135 non-cancer subjects were included in this study. CCND1 genotype at codon 242(G870A) in exon 4 was undertaken using denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC) and DNA sequencing. Significant odds ratio (OR) of the AA+GA genotypes [OR=7.5 (95% CI: 1.4-39.7)] was observed in non-drinkers but for non-smokers a non-significant [OR=5.4 (95% CI: 0.9-31.4)] was found in the adjusted model. These results suggest that allele A may be a risk factor for UADT cancer, especially in non-alcoholics. However, further epidemiological studies are needed to establish the exact role of CCND1 polymorphism and the development of UADT cancers.
Assuntos
Carcinoma de Células Escamosas/genética , Ciclina D1/genética , Neoplasias de Cabeça e Pescoço/genética , Polimorfismo Genético/genética , Adulto , Fatores Etários , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Alelos , Feminino , Genótipo , Humanos , Neoplasias Hipofaríngeas/genética , Neoplasias Laríngeas/genética , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Neoplasias Bucais/genética , Neoplasias Orofaríngeas/genética , Fatores de RiscoRESUMO
A tumorigênese do cólon é considerada como um processo complexo que ocorre em múltiplos passos, através de uma série de mutações gênicas capazes de promover a evoluçäo de uma lesäo precursora até um adenocarcinoma invasivo e metastático. O desenvolvimento e progressäo do câncer e a reversäo da tumorigenicidade säo acompanhados por complexas mudanças no padräo da expressäo gênica. Microarrays de cDNAs fornecem um poderoso instrumento para se estudar esses complexos fenômenos. O propósito deste estudo foi o de determinar a expressäo diferencial de genes em tumores coloretais em comparaçäo aos seus tecidos normais. Nós também investigamos a possível variabilidade da expressäo gênica entre misturas...